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骨髓来源抑制性细胞解决方案 MDSC cell Panel

发布日期: 2025-03-17 访问次数: 67

MDSCs(Myeloid-Derived Suppressor Cells,髓系来源的免疫抑制细胞)源自骨髓中的造血干细胞(HSC),在肿瘤、感染及慢性炎症等病理状态下扩增,具有显著的免疫抑制功能。

根据形态和功能,MDSCs可分为:

  • PMN-MDSCs:形态类似中性粒细胞,主要存在于肿瘤微环境。
  • M-MDSCs:形态类似单核细胞,参与炎症微环境调控。

其发育过程源自普通髓系祖细胞(CMP)、粒细胞-巨噬细胞祖细胞(GMP)及树突状细胞前体(MDP),在促炎因子的刺激下分化为功能性MDSCs。

MDSC Development

Fig 1. MDSCs分化与积累(来源:10.1038/s41590-017-0022-x)

MDSCs的抑制机制:

  • 代谢通路:ARG1 和 NOS2 协同消耗L-精氨酸,阻碍T细胞功能。
  • 免疫因子分泌:分泌IL-10、TGF-β、VEGF等因子,削弱抗肿瘤免疫。
  • 诱导Tregs:促进调节性T细胞的扩增,加强免疫抑制。

Fig 2. MDSCs分类与免疫抑制机制(来源:10.1038/nri2506)

人/小鼠MDSCs表型对比

特性 小鼠 MDSCs 人类 MDSCs
总标志物 CD11b+、GR-1+(Ly6G+) CD33+、HLA-DR-
细胞表型 Ly6C+、Ly6G+、CD115+ CD14+ 或 CD15+、CD66b+、IL-4Rα+
亚群 PMN-MDSC(Ly6G高)、M-MDSC(Ly6C高) CD15+(PMN型)、CD14+(M型)
功能 抑制T细胞/NK细胞活性,促进免疫逃逸
分泌因子 IL-10、TGF-β、VEGF、MMP-9

MDSCs流式检测步骤建议

  1. 样本制备:取新鲜外周血、骨髓或组织,制备单细胞悬液;组织需酶解消化。
  2. 红细胞裂解:血样需去除红细胞,推荐ACK裂解液。
  3. 染色面板设计:
    小鼠推荐抗体:CD11b、GR-1、Ly6C、Ly6G
    人源推荐抗体:CD33、CD14、CD15、HLA-DR
    死细胞排除染料:PI、7-AAD、Zombie Aqua等
  4. 染色孵育:每百万细胞加入荧光抗体,4°C避光孵育20-30分钟。
  5. 洗涤与重悬:使用PBS+2%FBS缓冲液,离心300g清洗2次。
  6. 流式检测:设置适当补偿与阴性/单染对照,推荐采集细胞数>30,000。
  7. 门控策略:排除碎片和死细胞后,依据物种进行特征性标志物筛选。

温馨提示:Ly6C与Ly6G染色需注意抗体克隆号之间的差异;对于HLA-DR低表达群体建议联合CD14或CD15进一步细分。