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第3期|抗体如何保存与分装?别让一瓶好抗体毁在冰箱里!

发布日期: 2025-06-26 访问次数: 30

 

在生命科学研究中,抗体的使用频率高、成本不菲,尤其是在高通量实验或重复验证中,一支抗体是否稳定、能否长期保存,会直接影响实验结果的可靠性与预算控制。然而,抗体储存这件事,往往被科研人员忽视。温度设得不合适、冻融次数过多、分装不规范,可能一不小心就毁了一整瓶。

本期,abinScience 将围绕抗体的“保存”与“分装”展开系统梳理,并结合常见的试剂标签与缓冲体系,帮助科研人员建立一套更科学、更稳定的抗体使用规范。

抗体储存条件概览:温度≠随便设,甘油≠万能解

常规IgG抗体的推荐储存温度通常为 –20°C 或 –80°C,不同厂家可能会有细微差别,建议优先参照产品说明书。但也要根据是否添加甘油、防腐剂以及抗体来源进行适配:

  • 含50%甘油的抗体:可于 –20°C 保存,无需担心冻裂,适合日常频繁取用。
  • 无甘油抗体:不建议反复冻融,建议分装并储存在 –80°C,降低蛋白结构损伤风险。
  • 短期保存(<1月):如配方中含叠氮钠(NaN₃),可考虑4°C保存,便于使用。
为什么抗体会受到温度影响

抗体是蛋白质,其结构依赖于氢键和疏水相互作用。高温(如室温或反复冻融)会导致蛋白质变性,破坏这些键,引发聚集或降解,从而降低抗体的特异性和结合活性。低温(如–80°C)可减缓这些反应,但不当冻融仍可能造成不可逆损伤,影响实验结果。

建议定期检查储存条件,避免因温度波动导致抗体失效。

对于易沉淀或敏感抗体,强烈建议避免反复冻融或长时间曝露于室温。

缓冲液与添加剂:你加的每一滴,都可能影响抗体性能

添加成分 作用机制 注意事项

添加成分 作用机制 注意事项
甘油(Glycerol) 降低冰点,防止冻融损伤 不适用于冷冻干燥
牛血清白蛋白(BSA) 提供蛋白稳定性,防止非特异吸附 可能干扰 ELISA 或偶联实验
叠氮钠(NaN₃) 抗菌,适合短期存储 对细胞毒性强,不适合细胞功能实验
Tris / PBS 常见缓冲系统,维持pH稳定性 无显著副作用
科研场景中若需进行偶联、活细胞实验或动物注射,优选 无添加(Preservative-free / Carrier-free) 的抗体产品,保障试剂纯度与活性。
分装操作指南:提前规划一次,节省十倍成本

每次开冻抗体,都是对其结构的挑战。蛋白类试剂反复冻融后可能发生聚集、降解,导致实验信号变弱甚至背景增强。正确的分装方式可以有效避免这些问题。

操作建议如下:

  • 准备无菌、低吸附的EP管或冻存管(推荐一次性无RNA酶/无DNA酶)。
  • 根据单次使用量进行小体积分装,如 10 μL、20 μL、50 μL 等。
  • 标记清晰,包括产品编号、批次、日期与浓度信息。
  • 操作全程保持低温,建议置于冰盒或冰块上完成。

部分高灵敏度应用(如IHC、IF)中,一次冻融即可能造成实验重复失败,分装几乎是“必选项”。

常见抗体标识说明(术语对照)

英文标识 中文含义 适用说明

英文标识 中文含义 适用说明
Preservative-free 无防腐剂 无叠氮钠、适用于活体实验或细胞功能实验
No preservative added 未添加防腐剂 同上,厂家表达方式不同
Azide-free 无叠氮钠 避免干扰细胞代谢,常用于体内应用
BSA-free 无牛血清白蛋白 减少非特异吸附干扰,适合偶联或层析应用
Carrier-free 无载体蛋白 适合抗原偶联、包被、标记等精细操作

如使用不含添加剂产品,请确保储存环境无菌,并尽快分装使用。

保存场景

常见抗体保存环境与实验应用示意图

Fig. 1 常见抗体保存环境示意图

结语

抗体保存与分装看似基础,实则关系到整个实验体系的质量控制。建立规范流程、选用合适产品、保持良好记录,是科研高效推进的保障。abinScience 提供多种无添加、高纯度抗体规格,支持定制分装和特殊应用需求,欢迎咨询选型建议。

下一期我们将进入抗体验证专题,敬请关注:

《第4期|如何选择一支好的内参抗体?—稳定表达才是真内参》