OMIP-011：8色Panel鉴定外周血中循环内皮细胞(CECs)

循环内皮细胞（CECs）以及骨髓来源的内皮前体细胞（EPCs）在周围血液中极为罕见，但在心血管问题和/或血管生成相关的不同疾病（如癌症、缺血和糖尿病）中具有很高的潜在诊断价值。由于循环内皮细胞通常通过多种细胞表面抗原的组合来鉴别，而这些抗原的表达水平低、不明显或呈连续分布，因此对其进行分析颇具难度。OMIP-011提出了一个优化的8色panel用于评估外周血中的循环内皮细胞（CECs）。

一、方案指标

二、圈门逻辑

三、实验结果展示

①FSC-A/SSC-A排除左上角和右下角的异常伪影，FSC-A/FSC-H去粘连。

②DNA染料Syto16+和live/dead标记NiRed-来排除死细胞、微颗粒和血小板，CD45-排除白细胞。

③CD31圈出内皮细胞群，分别通过CD34、CD146、CD106、CD117/SSC查看细胞群。

④CD34+CD146+细胞群用boolean gating分析，展示在CD106/SSC以及CD117/SSC中的分布。

四、方案解读

1. 优化的内皮标志物组合：CECs的分析挑战之一是其标志物的表达较弱，尤其是在传统的单一标志物检测中常常不能可靠识别。该面板通过结合CD31、CD34和CD146，能够更准确地分辨CEC，克服了标志物表达弱的难题。

2. 双平台定量方法：为了确保CEC数量的准确性，文章采用了结合TruCount微珠的双平台定量方法。这种方法不仅提高了CEC的检出率，也提高了样本之间的可比性，尤其是在血液样本中CEC极为稀有的情况下。

3. 激活CEC亚群的分析：CD106和CD117作为激活标志物的引入，使得该面板不仅能识别CEC，还能进一步分析其活化状态。这对于了解CEC在不同疾病中的作用至关重要，特别是在肿瘤和血管生成相关的研究中，活化CEC的角色可能与疾病的进展和预后密切相关。

五、小结

OMIP-011通过精心选择内皮标志物，并结合双平台方法，为准确分析和定量外周血中的循环内皮细胞（CEC）提供了一种有效的工具。该方案的提出不仅解决了传统方法中标志物表达弱和CEC稀有等问题，还为血管生成、心血管疾病等相关领域的诊断和监测提供了支持。

参考文献

[1] Lachmann R, Lanuti P, Miscia S. OMIP-011: Characterization of circulating endothelial cells (CECs) in peripheral blood. Cytometry A. 2012 Jul;81(7):549-51.

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