OMIP-012：9色Panel对人源化小鼠的精准解析与定量评估

人源化小鼠模型是研究人类免疫功能及相关疾病的重要体内平台，但其高度复杂的嵌合细胞环境对流式细胞分析提出了特殊挑战。OMIP-012正是为系统解决此类模型中的细胞定性与定量问题而设计。该方案的核心目标在于：精准区分人与小鼠的白细胞来源，实现主要人源淋巴细胞亚群的绝对计数，并建立一个可灵活调整以应对不同科学问题的分析框架。

一、方案指标

二、圈门逻辑

三、实验结果展示

1.外周血裂解红细胞后，去黏连，分别圈出微球群和细胞群。通过微球群计算绝对细胞数量；通过Mouse CD45/ Human CD45区分人和小鼠白细胞（展示三种不同样本的区别：正常NSG小鼠、健康人血液和人源化NSG-BLT小鼠），再通过Human CD45、CD3、CD19、CD4、CD8分别分析健康人血液和人源化NSG-BLT小鼠中不同细胞群。

2.在CD3-/CD19+细胞群中用CD8/CD56分析NK细胞群。

3.在CD4+、CD8+和CD3-/CD19+细胞群中查看不同样本细胞激活状态。

四、方案解读

1. 精准的物种解析：OMIP-012的核心挑战在于如何在一个混合细胞环境中绝对可靠地区分“人”与“鼠”的细胞。本方案通过采用经过交叉反应验证的种属特异性CD45抗体对，将这一技术挑战转化为面板设计的奠基性原理。该设计的核心创新在于，利用“人与鼠CD45绝不会共表达”这一生物学事实，大胆地将这两个抗体置于光谱高度重叠的通道。这一反常规操作，不仅未对分析造成干扰，反而将技术限制转化为系统优势，从根本上确保了后续所有门内细胞种属来源的纯粹性，为整个实验数据的可信度建立了不可动摇的基石。

2. 定量的数据基石：在人源化小鼠模型中，宿主自身不稳定的造血系统使得基于百分比的相对数据分析方法极易失真。OMIP-012强制性地将基于微球的绝对计数方法确立为该研究领域的金标准。这是获取可靠、可比较数据的唯一途径。通过直接报告“每毫升血液中的细胞绝对数量”，它成功地将免疫表型分析从描述“相对丰度”的模糊语境，提升至“精确计量”的客观水平，从而实现了不同个体、不同时间点以及不同实验室间数据的直接、有效比对。

3. 可扩展的分析平台：OMIP-012超越了“一次性”实验方案的局限，构建了一个可扩展、可定制的流式分析平台，其核心在于“模块化”设计思想。它将抗体分为两类：用于核心免疫分型的“锚定标记”（如CD45，CD3，CD4，CD8，CD19）和可根据科学问题灵活替换的“功能模块”。其前瞻性体现在，将有意识地“锚定标记”预置于非常规荧光通道，从而将PE、FITC、APC等主流通道预留为未来的“功能接口”。如附图4所示：无需改动核心鉴定框架，仅通过将HLA-DR (FITC)、CD38 (PE)和小鼠CD45 (APC)这三个“功能模块”替换为CD94 (FITC)、NKG2D (PE)和NKG2C (APC)，并新增CD16 (PerCP)，便从基础免疫分型面板快速衍生出一个全新的NK细胞表型分析方案。这种“即插即用”的设计，极大地提升了研究效率与体系的可持续性，使一个核心方案能够支撑起持续演进的科学探索。

五、小结

OMIP-012方案通过三个层面环环相扣的设计，为人源化小鼠的免疫分析提供了扎实的方法学支持。该方案的成功之处，在于它将一个复杂的生物学问题，通过清晰的流式细胞术逻辑转化为一个可执行、可重复且可扩展的分析流程。它不仅提供了一套抗体组合，更重要的是确立了一种分析嵌合体模型的全新范式，其核心在于优先保证细胞身份（物种来源）的绝对可靠，进而实现细胞数量的精确计量，并最终服务于细胞功能的灵活探究。正是这种系统性的设计思想，使得这份发布于十多年前的方案，至今仍是构建类似研究实验方案的经典参考与灵感来源。

参考文献

[1] Long BR, Stoddart CA. OMIP-012: Phenotypic and numeric determination of human leukocyte reconstitution in humanized mice. Cytometry A. 2012 Aug;81(8):646-8.

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