OMIP-013：13色Panel解析人T细胞分化状态

OMIP-013由Mahnke等人于2012年提出，是一个专门设计用于研究人类CD4+和CD8+ T细胞分化状态的多色流式细胞术panel。该panel为免疫学研究提供了强有力的工具，能够对多种T细胞亚群进行分类，这对于深入理解免疫反应及T细胞动态至关重要。

一、方案指标

二、圈门逻辑

三、实验结果展示

1. PBMC去黏连，圈出活的CD3+T细胞，然后去除染料粘连，再圈出主细胞群，通过CD4/CD8分别圈出CD4+T细胞和CD8+T细胞。

2. 分别在CD4+T细胞和CD8+T细胞中通过CCR7/CD45RA区分出不同T细胞的活化类型，然后通过CD27区分出：Tem（CD45RA-CCR7-CD27-），Ttm（CD45RA-CCR7-CD27），Tte（CD45RA+CCR7-CD27-），Tcm（CD45RA-CCR7+CD27+）

3. 在CD45RA+CCR7+CD27+细胞中通过CD95/CD31区分出：Tnv（CD95-），RTE（CD95-CD31+），在CD95+细胞中通过CD57/CD127圈出CD57-CD127+Tscm，还可通过CD27/CD28圈出CD27+CD28+Tscm。最后，将圈出的Tscm与CD4+T与CD8+T总细胞或者CD31+CD45RA+CCR7+亚群在CD244和CD31抗原表达做叠图处理。

注：RTE细胞只存在于CD4+T细胞

四、方案解读

1. 系统性定义T细胞分化路径：OMIP-013通过引入CD95 (Fas)和CD127 (IL-7Rα)，将分化路径从一个简单的分类表，升级为一个具有发育逻辑和功能指向性的动态轨迹。这种设计使得研究者不再是简单地“数”有几个亚群，而是能够描绘一条从TSCM→TCM→TEM→TTE的动态分化路径，并能够分离出处于路径起点的、最具治疗潜力的TSCM群体进行研究。这对于理解免疫记忆的形成、疫苗反应机制以及过继性细胞治疗（如CAR-T）中细胞产品的质量评估具有重大意义。

2. 兼顾稀有亚群与功能状态：（1）识别近期胸腺迁出者（RTE），在CD4+ Naïve T细胞（CD45RA+CCR7+）中，进一步通过CD31 (PECAM-1)的表达来界定RTE。这样可以在一次常规的T细胞分化分析中，同步评估个体的胸腺输出功能。（2）整合功能状态标记CD244，在清晰地划分出所有主要和稀有亚群后，进一步观察每个亚群内部的CD244表达水平。CD244是一个共抑制受体，它的表达与T细胞功能耗竭有关，这样可以了解不同分化阶段的T细胞的抑制性受体表达情况，能直接关联到它们的功能状态。

3. 高度结构化的实验设计理念：OMIP-013在开发过程中采用了优先级分层策略（Online Table 4），将抗体分为“必需”、“补充”和“可选”等级别，确保在有限的通道中优先保障核心标记的检测。这种思路为多色面板的构建提供了方法论参考。

五、小结

OMIP-013通过其创新性的panel设计和优化的试剂组合，成功实现了T细胞分化状态的高效识别。它的最大优势在于能够详细分析T细胞的各个分化阶段，特别是对TSCM和RTE等亚群的精准识别，使得它在免疫学研究中具有广泛的应用前景。

参考文献

[1] Mahnke YD, Beddall MH, Roederer M. OMIP-013: differentiation of human T-cells. Cytometry A. 2012 Nov;81(11):935-6.

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