在免疫实验中,选对一抗不仅能提高信噪比,还能有效控制变量、提升重复性。但面对“单抗、多抗、重组抗体”三大类,许多科研人员常感困惑:到底该如何选择?本期内容将为您一一解析!
分类 | 来源 | 特点描述 |
---|---|---|
多克隆抗体(Polyclonal) | 免疫动物血清(兔/羊/小鼠) | 识别多个表位,信号强,价格低,批次间差异较大 |
单克隆抗体(Monoclonal) | 杂交瘤细胞株 | 识别单一表位,特异性高,适合定量,稳定性中等 |
重组抗体(Recombinant) | 基因工程表达 | 高度一致性,工程可控性强,支持人源化,适合高通量和工业化需求 |
实验维度 | 多克隆抗体 | 单克隆抗体 | 重组抗体 |
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表位识别能力 | 多位点 | 单位点 | 单位点 |
批间稳定性 | 低 | 中 | 高 |
抗原修饰/变性适应性 | 强 | 中 | 强 |
特异性/背景干扰 | 一般 | 好 | 极佳 |
可持续供应 | 差 | 中 | 好 |
价格 | 低 | 中 | 高 |
推荐场景 | 早期探索/低丰度靶点 | 定量验证/复杂样本 | 标准化应用/多中心研究 |
实验类型 | 推荐抗体类型 | 说明 |
---|---|---|
Western Blot (WB) | 单抗 / 重组抗体 | 建议识别线性表位,重组抗体批次稳定、背景低,适合对照组比较 |
免疫组化 (IHC) | 单抗 / 重组抗体 | 对特异性要求高,避免背景染色;重组抗体表现出更好的组织一致性 |
酶联免疫 (ELISA) | 单抗(捕获)+多抗(检测)/ 重组抗体 | 捕获用单抗保证特异性,检测用多抗增强信号强度;重组抗体适合构建试剂盒 |
免疫荧光 (IF) | 单抗 / 重组抗体 | 要求构象表位识别好,背景低,推荐与荧光标记二抗配合使用 |
免疫沉淀 (IP/Co-IP) | 单抗 / 重组抗体 | 强调高亲和力、低背景,推荐使用与WB匹配的重组抗体 |
流式细胞术 (FCM) | 单抗 / 重组抗体 | 建议使用荧光标记重组抗体,保证一致性和数据稳定性 |
我们建议按照以下思路进行抗体选择:
二抗选择不当可能导致实验失败!第7期将为您带来:
敬请期待《第7期|二抗选不好,实验容易翻车?不同免疫实验的二抗选择全解析!》上线!
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